鬼峰是液相色譜中最常出現(xiàn)的問題之一，鬼峰來源多種多樣，理論上講，在HPLC系統(tǒng)中任何一個節(jié)點均有可能引入鬼峰，依據(jù)鬼峰出現(xiàn)的頻率，其主要來源于溶劑問題，儀器問題、流動相殘留氣泡以及操作不當?shù)取?/span>
讓我們主要從以下幾種情況分析鬼峰出現(xiàn)的原因
甲醇制備工藝相對乙腈來說較為簡單，雜質(zhì)含量也較少。但是由于甲醇紫外吸收范圍比乙腈廣，所以當使用紫外檢測器時，尤其是波長較低時，盡量使用乙腈作為有機相，用甲醇的話漂移太大。而用作梯度色譜的乙腈質(zhì)量要求較高，一般用進口梯度色譜專用乙腈能夠很好的減少鬼峰的出現(xiàn)。 另外如果有機相使用完后未更換新的流動相瓶，而是采用直接添加補充的方式也有可能會產(chǎn)出鬼峰。
很多單位用自制蒸餾水作為水相，但是結(jié)果并不是很好。原因就是一些低沸點的有機雜質(zhì)并不能夠通過蒸餾除掉。有條件的盡量用HPLC級的純水，沒有條件的也可用娃哈哈或是屈臣氏等水代替，但是如果色譜條件比較嚴格也是有可能出問題的。 此外，水相要現(xiàn)配現(xiàn)用，避免微生物滋長。
緩沖鹽、TFA、EDTA等試劑也會對流動相造成很大的影響，盡量用純度高的試劑配制流動相。
長時間的使用含水量較高的流動相（尤其是加入緩沖鹽的），細菌就容易在管路中滋生，細菌的代謝產(chǎn)物或是細胞碎片能造成鬼峰。
多為一些樣品組分在檢測器流通池內(nèi)的殘留，其特點具有先后針之間的重復性差，或者沒有重復性，色譜峰峰形特別尖銳類似大的毛刺。該種情形下，需要對流通池特別是石英視窗進行徹底清洗(聯(lián)系工程師或者嚴格按照manual進行)
造成系統(tǒng)壓力不穩(wěn)，從而產(chǎn)生鬼峰。早期島津的液相單向閥貌似不能用純乙腈作為流動相，現(xiàn)在應該已經(jīng)得到改進。
色譜柱可對流動相或系統(tǒng)流路內(nèi)的強保留污染組分起到富集作用，在有機相比例隨梯度程序變化的過程中而被沖洗出來。在使用較長的色譜柱的時候尤其值得關(guān)注，因此，在水相不確定是否有雜質(zhì)存在的條件下，梯度運行后的再平衡時間盡可能的短，一般以10倍柱體積為宜。
保留時間一般不可重現(xiàn)，即使流路中氣泡連續(xù)存在，鬼峰出現(xiàn)的位置亦不可預測?？蓪⒘鲃酉喑暬蚬腍e脫除氣泡并打開purge閥，大流速沖出儀器管路中的氣泡，來減少氣泡引起的鬼峰現(xiàn)象。
例如A為100%水，B為100%乙腈。在梯度條件允許的情況下盡量減少兩中流動相之間的差距，降低空氣在兩中流動相中溶解度的差異，從而減少氣泡的產(chǎn)生。
盛放流動相的容器或是樣品瓶受到污染：這種污染可能來自于洗滌劑、鉻酸洗液或是其他實驗人員用完后的殘留雜質(zhì)。流動相容器的清洗一般用干凈的水+有機溶劑涮洗就行，過多的清洗步驟反而可能造成二次污染。有時流動相容器的塑料蓋碎片都有可能是雜質(zhì)的來源。對于樣品瓶污染情況下的鬼峰，容易排除，僅需要分別將樣品溶解或稀釋用的試劑以及進樣小瓶更換，即可確定鬼峰的來源。pH計：很多pH計以聚碳酸酯作為外殼，然而聚碳酸酯是可以溶于有機溶劑的，所以盡量使用玻璃pH計來測量流動相的pH。濾膜：劣質(zhì)的或者型號錯誤的濾膜往往是鬼峰出現(xiàn)的原因。放置時間過長：流動相在空氣中暴露時間過長，就可能吸收空氣中的有機雜質(zhì)，有時流動相中的添加劑，例如TFA，時間長了會氧化從而產(chǎn)生雜質(zhì)。由自動進樣器引入的鬼峰：自動進樣器在進樣之后，部分樣品溶液殘留在進樣針頭以及針座之上，對下次進樣別的樣品的結(jié)果產(chǎn)生干擾，出現(xiàn)鬼峰。對于一些強吸附性組分，盡管進行程序洗針，有時依然可能會引入鬼峰。針對這種情形，可在儀器平衡之后，分別進樣不同試劑的Blank以及不進樣，比較得到的圖譜，基本可確定鬼峰是否來源于進樣過程。
這也是導致鬼峰的原因之一，這種問題很有可能導致樣品分為兩個不同的階段出峰，從而產(chǎn)生雙峰或者多峰。
鬼峰對于反相液相色譜來說，是經(jīng)常遇到的問題，對分析方法造成干擾并影響分析結(jié)果的準確性。從上面的討論可以看出，盡管鬼峰的來源多種多樣，基本應對原則就是，找到鬼峰的來源，更換流動相或更換添加劑或?qū)x器被污染部分進行清洗，在實驗中避免不正確的操作。
